ИССЛЕДОВАНИЕ КФ ПЦР (QF-PCR) ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧИСЛА ХРОМОСОМ 21, 13, 18, Х и У

КОЛИЧЕСТВЕННАЯ ФЛУОРЕСЦЕНТНАЯ ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ (КФ-ПЦР) КФ-ПЦР – это метод, основанный на амплификации, детекции и анализе коротких тандемных повторов ДНК, специфичных для каждой хромосомы (short tandem repeats – STR-маркер). На каждую хромосому приходится по 3-4 STR-маркера. Для ПЦР-амплификации используются флуоресцентно-меченные специфические праймеры для отдельных маркеров, по количеству и соотношению высоты пиков, выдаваемых капиллярным ДНК-анализатором, производится оценка числа копий хромосомы. Исследование выполняется преимущественно на ДНК из амниотической жидкости, но можно анализировать любой биоматериал, содержащий ДНК (пуповинная кровь, ворсины хориона или плаценты). Достоверность результата – 95-99%. Данное исследование выявляет анеуплоидии по хромосомам 13, 18, 21, X и Y, которые суммарно составляют около 80% от всех хромосомных перестроек, выявляемых у пациентов с умственной отсталостью и множественными врожденными пороками развития. Показания для проведения исследования: – высокий риск (>1:100) по результатам биохимического пренатального скрининга первого триместра (отклонения уровней маркерных сывороточных белков); – необходимость экспресс-диагностики анеуплоидии по хромосомам 13,18,21, X, Y; – однородительская дисомия (пара хромосом в нормальном наборе представлена гомологами или их сегментами от одного родителя). Ограничения при проведении исследования: – мозаицизм меньше 20-30%; – структурные перестройки хромосом; – возможно определение анеуплоидий только по тем хромосомам, к которым подобраны маркеры; – при наличии ультразвуковых маркеров хромосомной патологии предпочтительно кариотипирование плода, так как при кариотипировании могут быть выявлены структурные аномалии, аномалии по другим хромосомам и проще определены изменения, связанные с половыми хромосомами.